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4-15
PCR儀的特點(diǎn)是靈敏度高,污染是實(shí)驗(yàn)中常見的問題,只要實(shí)驗(yàn)室曾經(jīng)擴(kuò)增過某個(gè)片段,就有可能以后的實(shí)驗(yàn)中發(fā)生污染。所以,我們在實(shí)驗(yàn)前,可以用紫外燈破壞污染物。簡便快速,一次性加好反應(yīng),對標(biāo)本的純度要求低。PCR儀的反應(yīng)成分有模板濃度多高會(huì)導(dǎo)致反應(yīng)的非特異行增加,不能混合其他的物質(zhì)。引物濃度過高會(huì)導(dǎo)致模板與引物配錯(cuò),反應(yīng)特性下降。使用酶量增加使反應(yīng)特異性下降,如果太少,有影響產(chǎn)量。我們在試驗(yàn)中,會(huì)使用高特異行的酶,測試會(huì)比較。
4-10
PCR儀的新核酸定量技術(shù)已經(jīng)廣泛使用了。作為一種核酸定量技術(shù),它應(yīng)用較多且較成熟主要是在病原體檢測方面,其*性在此也得以充分體現(xiàn)。因此將其應(yīng)用于臨床具有很大潛力。在腫瘤、遺傳病研究,尤其是基因表達(dá)方面的研究,該技術(shù)應(yīng)用還較少,在這方面加強(qiáng)研究應(yīng)用,將會(huì)有廣闊的前景。將生物基因芯片技術(shù)結(jié)合,有助于PCR技術(shù)的進(jìn)一步完善,推動(dòng)該技術(shù)的發(fā)展、應(yīng)用。
4-7
熒光定量PCR儀反應(yīng)是一種新的核酸定量技術(shù)。這種技術(shù)將熒光能量傳遞技術(shù)應(yīng)用于常規(guī)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)儀中,從而進(jìn)行定量檢測。即是通過受體發(fā)色團(tuán)之間偶極一偶極相互作用,能量從供體發(fā)色團(tuán)轉(zhuǎn)移至受體發(fā)色團(tuán),轉(zhuǎn)移效率與曲個(gè)發(fā)色團(tuán)之間距離的6次冪倒數(shù)成比例?,F(xiàn)在在以前的PCR技術(shù)上得到進(jìn)一步發(fā)展,大大降低了誤差率,工作效率高,結(jié)果重現(xiàn)性好,且不必使用對人體造成傷害。與普通定量PCR相比,熒光定量PCR儀具有可實(shí)時(shí)監(jiān)測、準(zhǔn)確性高、效率高等優(yōu)點(diǎn)。
4-1
酶標(biāo)儀的主要目的是什么,我們?yōu)槭裁匆\(yùn)用它呢?我們通過計(jì)算機(jī)串口接收酶標(biāo)儀接口輸出的數(shù)據(jù),并將其轉(zhuǎn)變成實(shí)際值,利用判讀公式對OD值進(jìn)行判讀,zui終與相應(yīng)的病員資料掛接,存入數(shù)據(jù)庫中,實(shí)現(xiàn)酶標(biāo)儀數(shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)管理。我們先用系統(tǒng)中文版編寫數(shù)據(jù)接收、數(shù)據(jù)處理、病員資料管理、查詢、報(bào)告單打印等程序模塊,并集合編譯成Windows下能獨(dú)立運(yùn)行的單個(gè)可執(zhí)行文件。結(jié)果利用計(jì)算機(jī)的強(qiáng)大處理功能,采用全中文操作界面,具有操作簡單、數(shù)據(jù)判讀快速、檢驗(yàn)數(shù)據(jù)管理規(guī)范等特點(diǎn)。
3-28
我們知道酶標(biāo)儀的種類有好多種的,在選用的時(shí)候可能不知道該使用哪個(gè)?一般情況下,我們是這樣做的。根據(jù)工作需要去選擇。切忌刻意去求功能多,因?yàn)槿绻麅x器功能過多,易出故障。有些功能如酶標(biāo)動(dòng)力學(xué)或凝集等,可能根本就用不上。如果擬購置的酶標(biāo)儀主要是用于定性測定,則不必要求的定量所需的軟件系統(tǒng)。至于全自動(dòng)酶免疫分析系統(tǒng)則對工作量比較大的血站或大型醫(yī)院較為適用,對于日常工作量不太大的實(shí)驗(yàn)室,就無必要。第二是根據(jù)酶標(biāo)儀的性能去選擇。反應(yīng)酶標(biāo)儀性能的指標(biāo)主要有測定波長范圍,濾光片配置,檢測速度...
3-25
細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。貼壁細(xì)胞的消化法傳代:吸除瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。以50ml培養(yǎng)瓶為例,向瓶內(nèi)加入2-3ml胰蛋白酶,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶,使消化液流遍所有細(xì)胞表面。消化在37C或室溫25C以上環(huán)境下進(jìn)行。消化后把培養(yǎng)瓶放置顯微鏡下進(jìn)行觀察.發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后。應(yīng)立即終止消比,然后吸掉消化液后再加全培養(yǎng)液終止消化。用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞,吹打過程要順序進(jìn)行,從...
3-21
不管任何的產(chǎn)品,在決定購買前,你必須了解它的屬性以及事項(xiàng)。那我們在選用細(xì)胞株的時(shí)候,有什么值得注意呢?細(xì)胞株的生物等級(jí),由于有些細(xì)胞株及菌株屬于管制品,所以從國外購貨比較麻煩。在購買國外細(xì)胞株時(shí),需交待國外加比較多的干冰(一般在13公斤以上,采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。報(bào)關(guān)時(shí)盡量提供比較充足的證明材料,以免擔(dān)擱時(shí)間而導(dǎo)致干冰揮發(fā)完細(xì)胞株死亡,甚至于被退回給發(fā)貨人。還有在決定購買細(xì)胞株之前,必須仔細(xì)閱讀他們的培養(yǎng)信息。
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