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胰彈力蛋白酶(胰肽酶E)ELISA 試劑盒
間接法常用于檢測抗體,一般的操作步驟為:
將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原。
加入待測檢體,檢體中若含有待測的一次抗體,則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結(jié)。
洗去多余待測檢體,加入帶有酶的二次抗體,與待測的一次抗體鍵結(jié)。
洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗體的含量。
胰彈力蛋白酶(胰肽酶E)ELISA 試劑盒
血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在,后者會干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗體多用捕獲法,先將所有血清IgM(包括異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再測定特異性IgM。操作步驟如下:
⑴將抗人IgM抗體連接在固相載體上,形成固相抗人IgM。洗滌。
⑵加入稀釋的血清標(biāo)本:保溫反應(yīng)后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質(zhì)成分。
⑶加入特異性抗原試劑:它只與固相上的特異性IgM結(jié)合。洗滌。
⑷加入針對特異性的酶標(biāo)抗體:使之與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)結(jié)合。洗滌。
⑸加底物顯色:如有顏色顯示,則表示血清標(biāo)本中的特異性IgM抗體存在,是為陽性反應(yīng)。
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