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簡要描述:核轉(zhuǎn)錄因子(NF-kB)ELISA 試劑盒 Nuclear transcription factor Assay Kit!本公司長期經(jīng)營代理試劑盒,價(jià)格實(shí)惠,質(zhì)量保證,價(jià)格請咨詢在線人員。
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標(biāo)本要求
1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
核轉(zhuǎn)錄因子(NF-kB)ELISA 試劑盒
酶聯(lián)免疫吸附測定enzyme linked immunosorbent assay(簡寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結(jié)合專一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)為免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn),本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點(diǎn)等方面對其進(jìn)行了詳細(xì)介紹。
核轉(zhuǎn)錄因子(NF-kB)ELISA 試劑盒
過氧化物酶廣泛分布于植物中,辣根中含量高,從辣根中提取的稱辣根過氧化物酶(HRP),是由無色酶蛋白和深棕色的鐵卟啉構(gòu)成的一種糖蛋白(含糖量18%),分子量約40 000,約由300個(gè)氨基酸組成,等電點(diǎn)為pH 3-9,催化反應(yīng)的適pH值因供氫體不同而稍有差異,一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%飽和度以下的硫酸銨溶液。酶蛋白和輔基的大吸收光譜分別為275nm和403nm。
酶的純度以RZ表示:RZ=OD403/OD275
純酶的RZ多在3.0以上,高為3.4。RZ在0.6以下的酶制品為粗酶,非酶蛋白約占 75%,不能用于標(biāo)記。RZ在2.5以上者方可用于標(biāo)記。HRP的作用底物為過氧化氫,催化反應(yīng)時(shí)的供氫體有幾種:(1)鄰苯二胺(OPD),產(chǎn)物為橙色,可溶性,敏感性高,大吸收值在490nm,可用肉眼觀察判別,容易被濃H2SO4終止反應(yīng),顏色可在數(shù)小時(shí)內(nèi)不改變,是目前國內(nèi)ELISA中常用的一種;(2)聯(lián)大茴香胺(OD),產(chǎn)物為橘黃色,大吸收值在400nm,顏色較穩(wěn)定;(3)5-氨基水楊酸(5-AS):產(chǎn)物為深棕色,大吸收值在449nm,部分溶解,敏感性較差;(4)鄰聯(lián)甲苯胺(OT)產(chǎn)物為藍(lán)色,大吸收值在630nm,部分溶解,不穩(wěn)定,不耐酸,但反應(yīng)快,顏色明顯。
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